ebook Chromatografia cieczowa - teoria i praktyka Zygfryd Witkiewicz, Waldemar Wardencki, Irena Malinowska

Spis treści ebooka Chromatografia cieczowa - teoria i praktyka

Przedmowa 9
1. Wprowadzenie 11
1.1. Historia chromatografii cieczowej 11
1.2. Znaczenie chromatografii cieczowej 17
1.3. Istota rozdzielania chromatograficznego 19
1.4. Klasyfikacja układów chromatografii cieczowej 22
1.5. Podstawowe wielkości retencyjne i termodynamiczne 24
2. Chromatografia cieczowa kolumnowa 29
2.1. Aparatura do chromatografii cieczowej kolumnowej 29
2.2. Pompy chromatograficzne 32
2.2.1. Rodzaje i charakterystyka pomp chromatograficznych 32
2.2.2. Problemy związane z pracą pomp c 34
2.3. Dozowniki próbek 35
2.3.1. Dozowanie ręczne 36
2.3.2. Dozowanie automatyczne 37
2.4. Fazy ruchome 37
2.4.1. Właściwości faz ruchomych 37
2.4.2. Faza ruchoma a matryca próbki 44
2.4.3. Eluenty izoeluotropowe 44
2.4.4. Dobór składu fazy ruchomej 46
2.4.5. Problemy związane z fazą ruchomą 56
2.4.6. Oszczędzanie faz ruchomych 58
2.5. Kolumny i fazy stacjonarne 59
2.5.1. Kolumny tradycyjne 60
2.5.2. Kolumny monolityczne 64
2.5.3. Kolumny matrycowe 68
2.5.4. Fazy stacjonarne 71
2.5.5. Wskazówki dotyczące eksploatacji kolumn 82
2.6. Sposoby prowadzenia procesu chromatograficznego w kolumnowej chromatografii cieczowej 85
2.6.1. Chromatografia w normalnym i odwróconym układzie faz 85
2.6.2. Mechanizm retencji w normalnym układzie faz 89
2.6.3. Mechanizm retencji w odwróconym układzie faz 91
2.6.4. Elucja izokratyczna i elucja gradientowa 93
2.7. Rozdzielczość kolumn chromatograficznych 95
2.7.1. Parametry wpływające na proces rozdzielania 95
2.7.2. Pojęcie półki teoretycznej 97
2.7.3. Rozdzielczość kolumny w funkcji parametrów charakteryzujących selektywność i sprawność rozdzielania 104
2.7.4. Wpływ temperatury na rozdzielanie chromatografowanych substancji 106
2.8. Techniki kolumnowej chromatografii cieczowej 107
2.8.1. Chromatografia jonowa 109
2.8.2. Chromatografia wykluczania 114
2.8.3. Chromatografia powinowactwa 119
2.8.4. Chromatografia micelarna i mikroemulsyjna 121
2.8.5. Chromatografia oddziaływań hydrofilowych 123
2.8.6. Chromatografia oddziaływań hydrofobowych 127
2.8.7. Chromatografia par jonowych 128
2.8.8. Chromatografia przeciwprądowa 129
2.9. Detektory 131
2.9.1. Klasyfikacja detektorów 132
2.9.2. Ogólna charakterystyka detektorów 132
2.9.3. Charakterystyka detektorów używanych w kolumnowej chromatografii cieczowej 134
2.9.4. Detektor fotometryczny absorpcji w świetle widzialnym i nadfiolecie (UV-VIS) 136
2.9.5. Detektor fluorescencyjny 138
2.9.6. Detektor refraktometryczny 139
2.9.7. Detektory elektrochemiczne 141
2.9.8. Detektor konduktometryczny 141
2.9.9. Detektor aerozolowy promieniowania rozproszonego 142
2.9.10. Spektrometr mas 145
2.9.11. Spektrometr magnetycznego rezonansu jądrowego 150
2.9.12. Inne detektory 150
2.9.13. Problemy związane z detektorami 152
2.10. Analiza jakościowa 153
2.11. Analiza ilościowa 156
2.11.1. Metoda kalibracji bezwzględnej (wzorca zewnętrznego) 159
2.11.2. Metoda normalizacji wewnętrznej 161
2.11.3. Metoda wzorca wewnętrznego 162
2.11.4. Metoda dodatku substancji oznaczanej 164
2.11.5. Problemy w analizie ilościowej 165
2.11.6. Proteomika ilościowa 166
2.12. Szybka chromatografia cieczowa kolumnowa 167
2.13. Techniki wielowymiarowe w chromatografii cieczowej kolumnowej 170
2.13.1. Chromatografia dwuwymiarowa 171
2.13.2. Tandemowa chromatografia cieczowa kolumnowa 175
2.14. Chromatografia cieczowa kolumnowa łączona z innymi technikami analitycznymi 176
2.14.1. Połączenie chromatografu cieczowego ze spektrometrią mas wysokiej rozdzielczości 176
2.14.2. Chromatografia cieczowa łączona z magnetycznym rezonansem jądrowym 178
2.15. Szczególne zastosowania kolumnowej chromatografii cieczowej 179
2.15.1. Biochromatografia 180
2.15.2. Chromatografia związków chiralnych 183
2.15.3. Szybka chromatografia preparatywna 186
3. Chromatografia cienkowarstwowa 187
3.1. Wprowadzenie 187
3.1.1. Historia TLC – ważniejsze etapy rozwoju 187
3.2. Analiza za pomocą chromatografii planarnej 188
3.3. Płytki do chromatografii cienkowarstwowej 191
3.3.1. Samodzielna preparatyka płytek chromatograficznych 195
3.4. Fazy stacjonarne do chromatografii cienkowarstwowej 196
3.5. Eluenty (fazy ruchome) 200
3.6. Nanoszenie próbek na płytki chromatograficzne 200
3.7. Sposoby rozwijania chromatogramów 203
3.7.1. Rozwijanie liniowe 204
3.7.2. Rozwijanie odśrodkowe (cyrkularne) 204
3.7.3. Rozwijanie dośrodkowe (antycyrkulacyjne) 205
3.7.4. Mechanizm rozwijania chromatogramów 205
3.7.5. Rozwijanie jednokrotne i wielokrotne 207
3.8. Komory do chromatografii cienkowarstwowej 209
3.9. Chromatografia cienkowarstwowa z wymuszonym przepływem fazy ruchomej 212
3.9.1. Rotacyjna chromatografia planarna 212
3.9.2. Ciśnieniowa chromatografia cienkowarstwowa 213
3.9.3. Elektrochromatografia planarna 215
3.10. Detekcja i dokumentacja chromatogramów 215
3.10.1. Fizyczne metody detekcji 216
3.10.2. Chemiczne metody detekcji 220
3.10.3. Biologiczne metody detekcji 223
3.11. Sprzężenie TLC ze spektralnymi metodami detekcji 227
3.11.1. Sprzężenie TLC z detektorem płomieniowo-jonizacyjnym i/lub detektorem płomieniowo-fotometrycznym (TLC-FID/TLC-(FID-FPD)) 227
3.11.2. Sprzężenie TLC z MS 228
3.12. Chromatogramy planarne 229
3.12.1. Analiza jakościowa 230
3.12.2. Analiza ilościowa 232
3.13. Normalizacja w TLC 232
4. Przygotowanie próbek do analizy 237
4.1. Znaczenie i zasady przygotowania próbek do analizy 237
4.2. Przygotowanie próbek ciekłych 239
4.2.1. Ekstrakcja ciecz–ciecz 240
4.2.2. Ekstrakcja do ciała stałego 243
4.2.3. Mikroekstrakcja do fazy upakowanej 247
4.2.4. Mikroekstrakcja do fazy stacjonarnej 249
4.2.5. Mikroekstracja do kropli rozpuszczalnika 251
4.2.6. Ekstrakcja ruchomym elementem sorpcyjnym 252
4.2.7. Destylacja 254
4.3. Przygotowanie próbek stałych 254
4.3.1. Ekstrakcja rozpuszczalnikami 254
4.3.2. Ekstrakcja rozpuszczalnikami pod zwiększonym ciśnieniem 256
4.3.3. Ekstrakcja nadkrytyczna 257
4.3.4. QuEChERS 259
4.4. Derywatyzacja 260
4.5. Przygotowanie próbek biologicznych do analizy 261
4.5.1. Przygotowanie próbek do analizy kwasów nukleinowych w genomice 262
4.5.2. Przygotowanie próbek do analizy białek w proteomice 263
4.5.3. Przygotowanie próbek do analizy leków i ich metabolitów oraz biomarkerów w organizmach żywych 264
Indeks 267